نحوه استخراج DNA توت فرنگی |
مقدمه
توت فرنگی یکی از محبوب ترین میوه ها در سراسر جهان است که به خاطر شیرینی، آبدار بودن و فواید تغذیه ای اش شناخته شده است. استخراج DNA از توت فرنگی میتواند یک فعالیت سرگرم کننده و آموزشی برای دانش آموزان، محققان و علاقه مندان باشد.
مواد مورد نیاز
قبل از شروع فرآیند استخراج، به مواد زیر نیاز دارید:
- توت فرنگی تازه (ترجیحا رسیده)
- آب مقطر
- صابون ظرفشویی
- نمک (اختیاری)
- فیلتر قهوه یا دستمال کاغذی
- پیمانه و قاشق اندازه گیری
- فر مایکروویو (اختیاری)
- سانتریفیوژ مینیاتوری (اختیاری)
- پیپت (اختیاری)
- میکروسکوپ (اختیاری)
مرحله 1: آماده سازی
1. قبل از شروع آزمایش دست های خود را کاملا بشویید.
2. برای بهترین نتیجه، توت فرنگی تازه و رسیده را انتخاب کنید.
3. کلاهک ها و ساقه های سبز توت فرنگی را بردارید و آنها را دور بریزید.
4. توت فرنگی ها را با آب مقطر بشویید تا هرگونه کثیفی یا زباله از بین برود.
5. توت فرنگی ها را با چنگال یا مخلوط کن له کنید تا دیواره های سلولی شکسته شده و DNA آزاد شود.
مرحله 2: سانتریفیوژ
1. 1-2 قاشق غذاخوری صابون ظرفشویی را به 1 فنجان آب مقطر در یک کاسه اضافه کنید.
2. توت فرنگی های له شده را به مدت 5 تا 10 دقیقه در محلول صابون خیس کنید.
3. مخلوط توت فرنگی را با سرعت 10000 دور در دقیقه به مدت 5 تا 10 دقیقه سانتریفیوژ کنید تا DNA از سلول ها جدا شود.
4. مایع رویی را دور بریزید و گلوله را جمع کنید.
مرحله 3: استخراج DNA
1. 1/2 قاشق چایخوری نمک به گلوله اضافه کنید و خوب مخلوط کنید.
2. 1/2 فنجان آب مقطر را به مخلوط اضافه کنید و خوب هم بزنید.
3. 10-15 دقیقه صبر کنید تا DNA حل شود.
4. مخلوط را با سرعت 10000 دور در دقیقه به مدت 5 تا 10 دقیقه سانتریفیوژ کنید تا DNA از بقایای سلولی جدا شود.
5. مایع رویی را دور بریزید و گلوله را جمع کنید.
مرحله 4: تصفیه
1. گلوله را به یک لوله تمیز منتقل کنید.
2. 1/2 فنجان اتانول را به لوله اضافه کنید و خوب مخلوط کنید.
3. مخلوط را با سرعت 10000 دور در دقیقه به مدت 5 تا 10 دقیقه سانتریفیوژ کنید تا DNA از بقایای سلولی جدا شود.
4. مایع رویی را دور بریزید و گلوله را جمع کنید.
5. مراحل 4 و 5 را تکرار کنید تا زمانی که گلوله دیگر قابل مشاهده نباشد.
مرحله 5: تجسم
1. 1/2 فنجان آب مقطر را به گلوله اضافه کنید و خوب مخلوط کنید.
2. مخلوط را به لام میکروسکوپ منتقل کنید.
3. یک قطره آب به اسلاید اضافه کنید و زیر میکروسکوپ مشاهده کنید.
4. از یک پیپت برای جمع آوری نمونه کوچکی از DNA و مشاهده زیر میکروسکوپ استفاده کنید.
نکات و ترفندها
1. برای بهترین نتیجه از توت فرنگی تازه استفاده کنید.
2. توت فرنگی ها را کاملا له کنید تا DNA آزاد شود.
3. از یک فضای کاری تمیز و استریل برای جلوگیری از آلودگی استفاده کنید.
4. هنگام سانتریفیوژ و خالص سازی DNA صبور باشید و وقت خود را صرف کنید.
5. از میکروسکوپ برای تجسم DNA و اطمینان از استخراج موفقیت آمیز استفاده کنید.
6. DNA استخراج شده را در یک لوله تمیز در دمای -20 درجه سانتیگراد برای نگهداری طولانی مدت نگهداری کنید.
7. از یک پیپت برای اندازه گیری دقیق حجم محلول DNA استفاده کنید.
8. برای جلوگیری از آلودگی از نوک پیپت تمیز و استریل برای هر اندازه گیری استفاده کنید.
9. برای جلوگیری از سردرگمی، لوله ها و نمونه ها را به طور واضح و دقیق برچسب بزنید.
10. پس از آزمایش، گلوله DNA و مایع رویی را به درستی دور بریزید.
11. هنگام دست زدن به DNA از دستکش و عینک ایمنی استفاده کنید تا آسیب نبیند.
12. اگر در طول آزمایش با مشکلاتی مواجه شدید، با مواد مرجع و کارشناسان مشورت کنید.
فرم در حال بارگذاری ...
[جمعه 1403-04-01] [ 01:39:00 ق.ظ ]
|